如何提高显微镜的分辨率

显微镜做为测试设备的首要设施之一，而评定显微镜特性的主要标准是分辨率。分辨率就是指能清晰地辨别2个小一点或两条线间的较小间距。人的眼睛自身便是一台显微镜，在规范照明灯具标准下，人的眼睛在明视距离（国际性认可为25cm） 上的分辨率等于1/ 10mm。针对观查两根平行线而言，因为平行线能刺激性一系列神经元细胞，双眼的分辨率还能提升一些。

人的眼睛的分辨率仅有1/ 10mm， 那麼比1/ 10mm 小的物品或比1/ 10mm 近的2个细微物件的间距，人的眼睛就不能辨别了。因此产生了从容易的宏观经济高倍放大镜到外部经济观察的电子光学显微镜，进而电子器件显微镜。显微镜的分辨率界定通常是指在标本采集上可以清晰辨别的2个小一点中间的较小间距。其计算方法为：

D=0.61λ／NA

式中：D 为分辨率（um）；λ 为灯源波长（um）；NA 为物镜的标值规格（也称镜口率）。

由公式计算可获得，显微镜的分辨率决策于入射角源的波长及其所配对物镜的数值孔径。由此可见，提升电子光学显微镜的方式：

1、减少灯源波长。

能见光较短波长为390nm,若用此波长的紫外光做为照明灯具灯源，可使电子光学显微镜的分辨率减少至0.2um。可是因为大部分一般材质的夹层玻璃会大量的消化吸收340nm下列波长的光，紫外光通过很多损耗没法建立清楚、光亮的图象。因而迫不得已应用石英石(可通过低达200nm的紫外光)、荧石(可透过低达185nm的紫外光)等昂贵的原材料，而且紫外光显微镜不能用人眼开展观查，乃至受观察试品的限定，再加之贵的工程造价，因此这类提升显微镜分辨率的方法因为其本身的局限而不会受到广泛运用。

2、提升物镜的数值孔径NA.

数值孔径NA=n*sin(u)

式中，n为物镜与标本采集中间的物质折射率；u为物镜的二分之一直径角。因而，从光学系统上适度选用很大的直径角，或是扩大折射率变成较常用的提升电子光学显微镜分辨率的方式。一般高倍物镜如10X下列其物质选用气体，折射率为1，即干躁系物镜；浸水物质是纯净水，其折射率为1.33；油变物镜物质是香柏油路或其他全透明油，其折射率一般在1.52 上下，贴近双光透镜和盖玻片的折射率，如Olympus 的100X油镜。浸水物镜和油浸物镜不但变大倍率高并且因为应用高折射率的物质，进而提升物镜的分辨率。